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培養(yǎng)人胚腎細胞HEK-293需要注意這些事情

更新時間:2023-02-02 點擊量:544
  人胚腎細胞HEK-293是人類胚胎腎細胞,起初由荷蘭生物學家AlexVanderEb在1970年代初期分離和培養(yǎng)。VanderEb實驗室的博士后FrankGraham用剪切的腺病毒5(Ad5)DNA進行轉(zhuǎn)染。這是他們的第293次實驗,所以就命名該細胞系為HEK293,蓋細胞系的主要作用是通過細胞的基因改造實現(xiàn)重組蛋白合成。
  使用HEK293細胞有很多優(yōu)點。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護的細胞系,分裂迅速,大約每36小時可以增長1倍。培養(yǎng)的細胞既能用于瞬時和穩(wěn)定表達,也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng),比較容易轉(zhuǎn)染,并且能夠產(chǎn)生大量的重組蛋白。
  
  培養(yǎng)注意事項
  1.HEK293在進行傳代培養(yǎng)時,長期培養(yǎng)會導致細胞活力下降,所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過多,通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下,如果選擇的細胞系超過20代,需要需要解凍新的細胞重新開始。
  2.實驗操作過程中需要注意無菌操作,避免支原體感染,同時做好定時檢測。
  3.由于HEK293細胞系的衍生物較多,所以培養(yǎng)時需要根據(jù)實驗選擇合適的細胞系進行培養(yǎng)。
  目前,人胚腎細胞HEK-293主要用于癌癥研究、新藥開發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號轉(zhuǎn)導和蛋白質(zhì)相互作用研究等領域。