簡要描述:Jurkat人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞介紹:種屬:人;貼壁生長;生長周期:3~4天組織來源:T淋巴細(xì)胞;急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞形態(tài):淋巴細(xì)胞樣細(xì)胞類型:腫瘤細(xì)胞腫瘤類型:白血病細(xì)胞
產(chǎn)品型號: YKL-Jurkat
所屬分類:細(xì)胞庫
更新時間:2024-04-30
Jurkat人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4)貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5)懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。
Jurkat人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)補(bǔ)加到6ml。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 收到細(xì)胞后傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。換液可通過添加幾毫升新鮮培養(yǎng)基或離心之后去上清液,添加新培養(yǎng)基重懸培養(yǎng)。
2) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為類:
1,細(xì)胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min,1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。