簡要描述:HOEC人口腔上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗 培養(yǎng)溫度:37℃ 二氧化碳濃度:5% 簡介:人口腔上皮細(xì)胞HOEC取自女性供體,上皮樣,貼壁培養(yǎng) 注釋:倍增時(shí)間54h
產(chǎn)品型號: RHOEC
所屬分類:細(xì)胞庫
更新時(shí)間:2024-04-29
HOEC人口腔上皮細(xì)胞
HOEC人口腔上皮細(xì)胞
培養(yǎng)體系:DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:人口腔上皮細(xì)胞HOEC取自女性供體,上皮樣,貼壁培養(yǎng)
注釋:倍增時(shí)間54h
接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.細(xì)胞收到后建議在培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時(shí)左右再依據(jù)細(xì)胞密度,換液培養(yǎng)或傳代。
2.如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞及時(shí)離心,加15%血清的wan全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶中繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的wan全培養(yǎng)基,培養(yǎng)2-3天。若3天后細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室,技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決。
3.貼壁細(xì)胞生長緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(最高不超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
4.生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)生長不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加1~2ml0.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1~2min)。
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁運(yùn)動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?,加6~8mlwan全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落、吹散。
3.取出部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)膚an全培養(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%時(shí)重復(fù)傳代操作或者凍存